Hiperhomocysteinemia wzmaga stan zapalny naczyń i przyspiesza miażdżycę tętnic w modelu mysim cd

Co ważne, te poziomy HC były istotne z punktu widzenia patofizjologii. Na przykład w grupie osób starszych badanych przez badaczy Framingham poziomy HC w osoczu mieściły się w zakresie od 4,13 do 219,84. M (2). Tabela 1: indukcja HHcy u myszy z apoE-null: wpływ na poziomy lipidów, glukozy i witamin Indukcja HHcy była związana z około dwukrotnym wzrostem średniego obszaru miażdżycowego w zatoce aortalnej u myszy karmionych dietą B w porównaniu z myszami karmionymi dietą kontrolną A (Ryc. 1, b i f versus a i e, odpowiednio, i ryc. 1i) po 8 tygodniach. Myszy HHcy wykazywały zwiększoną liczbę złożonych zmian miażdżycowych w zatoce aortalnej, definiowanej jako obecność włóknistych zakrętek, rozpad cholesterolu lub martwica, w porównaniu z kontrolami (Figura 1j). Zmiany miażdżycowe u myszy HHcy charakteryzowały się zwiększoną liczbą makrofagów (antygen Mac-3) (patrz Figura 5d) i komórkami mięśni gładkich (dane nie przedstawione) w porównaniu z myszami karmionymi dietą A. Skutki HHcy nie były spowodowane zmianami w lipidach. lub metabolizm glukozy, ponieważ poziomy cholesterolu, triglicerydów, glukozy i hemoglobiny glikozylowanej (pomiar wydłużonej kontroli glikemii) pozostały niezmienione w porównaniu z myszami karmionymi karmą kontrolną (Tabela 1). Ponadto oddzielenie składników lipoprotein osocza za pomocą szybkiej chromatografii cieczowej (FPLC) nie wykazało różnic w wielkości i profilu lipidów (dane nie pokazane). Co ważne, przyspieszona miażdżyca obserwowana u myszy karmionych dietą B nie była spowodowana zmniejszonymi poziomami kwasu foliowego, witamin B6 i B12, ponieważ myszy karmione dietą D (poziomy podstawowe metioniny, ale obniżony poziom kwasu foliowego, witaminy B6 / B12) nie były przyspieszone miażdżycowy obszar uszkodzenia lub złożoność w porównaniu z myszami karmionymi dietą A (Figura 1, odpowiednio d i h względem a i e, i Figura 1, i. j). Rycina Wywołanie HHcy przyspiesza zmiany i złożoność zmian miażdżycowych. Samce myszy bez apoE-null, w wieku 4 tygodni karmiono (a, e) dietą A, n = 30; (b, f) dieta B, n = 30; (c, g) dieta C, n = 30 lub (d, h) dieta D, n = 10, przez 8 tygodni. Myszy uśmiercono i wykonano sekcję drzewa aorty (podziałka, 2 mm) (a. D). Sekwencje seryjne przygotowano w zatoce aortalnej i wybarwiono czerwienią olejową O (podziałka, 50 | jm) (eł). Średni obszar zmian miażdżycowych (i) i złożoność (j). SD są zgłaszane. (i) AP <0,01 vs. diety A, C i D. (j) BP <0,01 w liczbie złożonych uszkodzeń w porównaniu do obserwowanych u myszy otrzymujących diety A, C lub D. W i i j, wszystkie myszy w tym w analizowanych grupach eksperymentalnych. Figura 5 Włączenie HHcy wzmaga ekspresję TF. (a) HUVEC eksponowano na wskazane stężenie BSA, L-HC lub L-cysteiny przez 8 godzin. Komórki zebrano i przygotowano do immunoblottingu przy użyciu koziej anty-szczurzego TF IgG (0,5 .g / ml). AP <0,05 w porównaniu do ścieżek i 3. (b-h) Myszy ApoE uśmiercono po 8 tygodniach wskazanej diety, usunięto aortę i przygotowano lizaty. Białko (10 .g) poddano SDS-PAGE i przeniesiono na nitrocelulozę. Immunoblotting przeprowadzono z kozim anty-szczurzym TF IgG (1 .g / ml). Wskazano markery masy cząsteczkowej. Przeprowadzono analizę densytometryczną; jednostki pikselowe z tkanki aortalnej otrzymane od myszy otrzymujących dietę A lub HUVEC traktowane BSA arbitralnie przypisano względną wartość BP <0,01 vs. dieta A i C. W b, przeprowadzono analizę immunoblottingu na lizatach od n = 10 myszy na dietę. ; Przedstawiono reprezentatywne eksperymenty. W c-h myszy apoE-null karmiono dietą A (c, f), dietą B (d, g) lub dietą C (e, h), przez 8 tygodni. Po uśmierceniu, seryjne skrawki w zatoce aortalnej przygotowano i wybarwiono anty-Mac-3 IgG (c. E) (10. G / ml) lub kozim anty-szczurzym TF IgG (f. H) (10. G / ml ). W c h, przeprowadzono analizę immunohistochemiczną n = 5 myszy / dietę; Przedstawiono reprezentatywne eksperymenty. Pasek skali, 50 .m. Ponieważ te odkrycia sugerują, że indukcja HHcy przez wzbogacenie diety w metioninę (dieta B), a nie wyłącznie w dietetyczny ubytek kwasu foliowego i witaminy B6 / B12 (dieta D), przyspieszona aterogeneza, skupiliśmy się na badaniach na myszach karmionych dietą A i B. Aby zbadać molekularne konsekwencje HHcy w układzie naczyniowym, szukaliśmy dowodów na aktywację NF-kB, ponieważ ten czynnik transkrypcyjny został powiązany z modulacją odpowiedzi prozapalnej (26-27). Wcześniejsze badania in vitro wykazały, że inkubacja komórek mięśni gładkich naczyń (VSMC) z L-HC (500 .M) spowodowała nasiloną translokację jądrową NF-kB (28). Zgodnie z tymi obserwacjami ekspozycja HUVEC na L-HC (100 .M) spowodowała około 2,4-krotny wzrost aktywacji NF-kB, w porównaniu z EC traktowanymi BSA lub L-cysteiną (100 .M) (fig. 2a, ścieżki 2, i 3, odpowiednio) [więcej w: eve online pl, eve online poradnik, eve online trial ] [hasła pokrewne: rezonans magnetyczny kościerzyna, olej z awokado właściwości, ostrzykiwanie osoczem cena ]