Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy ad 5

Białko fuzyjne nie posiada domen regulatorowych BRAF, co powoduje konstytutywną aktywację kinazy w sposób niezależny od RAS i wykazuje aktywność transformacji podobną do tej z najczęściej stosowanego BRAFV600E. Partner fuzyjny BRAF, gen AKAP9, należy do grupy kotwiczących białek kinazowych A, które mają wspólną funkcję wiązania się z regulacyjną podjednostką PKA i kierowania jej na dyskretne miejsca w komórce (29). Szczególnie AKAP9 ma przeważnie centrosomalny i Golgowy podział (19. 21). Białko fuzyjne nie posiada domeny centrosomalnej C-końcowej i, jak można się spodziewać, traci lokosomową lokalizację w komórkach nowotworowych. Continue reading „Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy ad 5”

Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy czesc 4

Podobne wyniki uzyskano w 2 niezależnych eksperymentach. Zdolność białka fuzyjnego AKAP9-BRAF do indukowania transformacji badano w teście ogniskowania komórek NIH3T3 (Figura 4C). Vector i BRAFWT stransformowały komórki przy bardzo niskiej wydajności. AKAP9-BRAF wykazywał najwyższą aktywność transformacji w tym teście, a następnie H-RASG12V i BRAFV600E. Ponadto, komórki NIH3T3 trwale transfekowane pustym wektorem, BRAFWT, AKAP9-BRAF, BRAFV600E i H-RASG12V badano pod kątem rakotwórczości u myszy nagich. Continue reading „Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy czesc 4”

Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy cd

Kilka izoform powstających w wyniku alternatywnego składania ulega selektywnej ekspresji w większości ludzkich tkanek przy małej obfitości (19, 20). Białko AKAP9 lokalizuje się za pomocą immunofluorescencji jako pojedyncza okołojądrowa kropka i część otaczającej rozproszonej fluorescencji, odpowiednio odpowiadającej centrosomowi i przedziałom Golgiego, w komórkach interleukowej HeLa i SaOS2 osteosarcoma (19, 20). W oparciu o sekwencję chimerycznego cDNA przewiduje się, że białko fuzyjne nie będzie zawierało 2 przypuszczalnych regionów wiążących RII i domeny lokalizacji centrosomu AKAP9 (20, 22, 23). W brodawkowatych raku tarczycy, ujemnym pod względem fuzji oraz w nienowotworowej tkance tarczycy, ekspresja AKAP9 była łatwo wykrywalna za pomocą RT-PCR (dane nie przedstawione), a białko było postrzegane jako pojedyncza okołojądrowa kropka z lekkim rozlanym barwieniem cytoplazmatycznym (Figura 3A) . W nowotworze eksprymującym białko AKAP9-BRAF, okoń-jądro nie było już możliwe do zidentyfikowania, podczas gdy w cytoplazmie obserwowano rozproszone barwienie (Figura 3B). Continue reading „Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy cd”

Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy ad

Możliwość udziału BRAF w rearanżacji chromosomów badano metodą fluorescencyjnej hybrydyzacji in situ (FISH). Kontig klonów sztucznego chromosomu 3 P1 o wielkości około 330 kb, obejmujący cały gen BRAF, złożono do użycia jako sondy (Figura 1A). Łagodne komórki tarczycy wykazały zgodnie z oczekiwaniami 2 sygnały. Analiza 32 nowotworów brodawkowatych tarczycy wykazała obecność guza zawierającego 3 sygnały, podczas gdy następna hybrydyzacja z sondą centromerową 7 chromosomu wykazała obecność 2 kopii chromosomu (Figura 1B). Ponieważ podział jednego sygnału BRAF doprowadził do powstania pary sygnałów znajdujących się we względnie stałej odległości od siebie, prawdopodobnym mechanizmem tego zdarzenia była inwersja wewnątrz chromosomów. Continue reading „Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy ad”

Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy

Geny kluczowe dla rozwoju raka można zmutować za pomocą różnych mechanizmów, które mogą odzwierciedlać naturę mutagenu. W raku brodawkowatym tarczycy, mutacje genów kodujących efektory wzdłuż szlaku MAPK są kluczowe dla transformacji. Mutacja punktowa BRAF występuje najczęściej w sporadycznych guzach. Natomiast nowotwory wywołane promieniowaniem są związane z inwazją paracentryczną aktywującą receptorowe kinazy tyrozynowe RET i NTRK1. Zgłaszamy tutaj przegrupowanie BRAF przez paracentryczną inwersję chromosomu 7q, w wyniku czego powstaje fuzja w ramce między eksonami (8 z genu AKAP9 i eksonami 9 (1818 z BRAF. Continue reading „Onkogenna fuzja AKAP9-BRAF jest nowym mechanizmem aktywacji szlaku MAPK w raku tarczycy”

Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby ad 7

Te dane sugerują brak PPAR. sygnalizacja w tym modelu szczurzym z niedoborem białka, podnosząc możliwość, że endogenne ligandy nie aktywują PPAR. i wynikające z tego efekty homeostatyczne. Alternatywnie, ścieżki inne niż PPAR. sygnalizacja może przyczynić się do FAO i oszczędzania energii w sekrecji podczas przewlekłego niedoboru makroskładników. Continue reading „Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby ad 7”

Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby ad 6

Chociaż obecne badania koncentrują się w dużej mierze na zespole metabolicznym związanym z niedożywieniem, istnieje również duży potencjał dotyczący niedożywienia dzieci. Globalnie, niedożywienie przyczynia się do połowy wszystkich zgonów dzieci poniżej piątego roku życia (68). Gdy obecne są we wczesnym dzieciństwie, niedożywienie powoduje długoterminowy deficyt potencjału wzrostu i IQ, wraz ze wzrostem ryzyka otyłości i powiązanych zaburzeń w późniejszym życiu (69). Pomimo ostatnich postępów w realizacji Milenijnych Celów Rozwoju (70), ponad 113 milionów dzieci na świecie pozostaje niedoważonych (71). Podobnie jak w stanie ostrego postu, chroniczne niedożywienie wymaga od gospodarza zachowania i recyklingu aminokwasów i energii. Continue reading „Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby ad 6”

Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby ad 5

W jednym profilu działania fenofibratu u myszy (67), prawie połowa (145/333) panelu specyficznych dla wątroby genów została zmieniona przez PPAR. leczenie agonistyczne, a tych 110 (75,8%) było represjonowanych (ryc. 2A). Jak potwierdzono analizami wykorzystującymi Gene Ontology (www.geneontology.org) i Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG; www.kegg.jp/) (Figura 2B), te supresowane geny są wysoko wzbogacone w wydzielane białka, w tym wiele dodatkowych do składników kaskady dopełniacza i koagulacji. To wzbogacenie celów wydzielniczych PPARa jest wysoce statystycznie znaczące. Continue reading „Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby ad 5”

Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby czesc 4

Wszyscy czterej pacjenci mieli również koagulopatię. Ten nieoczekiwany fenotyp występował od urodzenia, na długo przed wystąpieniem ciężkich objawów wątroby, a zatem nie mógł być przypisany schyłkowej chorobie wątroby. Cztery osobne linie dowodów potwierdzają bezpośrednią rolę FXR jako ścieżki dopełniacza i koagulacji. Po pierwsze, wykazaliśmy, że GW4064 indukuje wiele składników szlaku dopełniacza i krzepnięcia w ludzkiej linii komórek hepatocytów (9), rozszerzając wcześniejsze wyniki na fibrynogen. Po drugie, analiza ogólnobomenowych badań wiązania FXR w mysich i ludzkich hepatocytach wykazała obecność dopełniacza i koagulacji na liście docelowych ścieżek (53). Continue reading „Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby czesc 4”

Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby cd

Inni sugerują, że hamowanie FXR dobrze znanego SREBP1c jest ukierunkowane na syntazę kwasów tłuszczowych (Fasn) i karboksylazę acetylo-CoA (Acc1) jest niezależne od wpływu na SREBP1c (40). Hamowanie lipogenezy jest zgodne ze zdolnością agonistów FXR do poprawy wielu aspektów zespołu metabolicznego, nie tylko w modelach mysich (31, 32), ale także u ludzi (47); jednakże jest to oczywiście niezgodne z indukcją tej drogi w stanie po posiłku. Mniej informacji na temat wpływu PPAR. na temat lipogenezy de novo. Istnieje doniesienie, że przewlekłe leczenie fenofibratem indukuje lipogenezę w połączeniu z indukcją FAO (37), daremnym cyklem, którego nie obserwuje się w odpowiedzi na głodówkę, oraz analizą ekspresji genu Fasn w poszczeniu i karmieniu Ppara. Continue reading „Receptory jądrowe wyczuwające substancje odżywcze PPAR i FXR kontrolują równowagę energetyczną wątroby cd”