Regulacja rozprzestrzeniania się napadów przez neuroserpinę i tkankowy aktywator plazminogenu jest niezależna od plazminogenu czesc 4

Wyniki tych eksperymentów wykazały, że utrata neuronów hipokampa po napadach indukowanych KA wystąpiła obustronnie (ryc. 3) i że leczenie neuroserpiną zdawało się zmniejszać śmierć komórek w obu hipokampach. Efekt ten był bardzo istotny w warstwie CA3 obu hipokampów, mimo że neuroserpinę wstrzykiwano tylko do hipokampa po stronie. Figura 3 Całościowa analiza utraty neuronów w hipokampie 24 godziny po ataku. Terapie KA i neuroserpin były takie, jak opisano w Methods. Zwierzęta uśmiercono 24 godziny po wstrzyknięciu KA, skrawki tkanek wybarwiono H & E, a neurony przeżywające w CA1-CA3 i warstwy zakrętu zębatego (DG) hipokampu zliczono mikroskopowo i porównano z odcinkami kontrolnymi od nieleczonych zwierząt. (a) Wyniki tej analizy (n = 3 dla każdego warunku). * P <0,05 względem tej samej warstwy komórek od zwierząt traktowanych PBS. Ja, ipsilateralnie; C, kontralateralny. (b) Barwienie H & E normalnego szczurzego hipokampa na styku warstw CA2 i CA3. (c) Ten sam region 24 godziny po wstrzyknięciu KA. Oryginalne powiększenie, × 200. Otwarte strzałki w c pokazują przykłady komórek policzonych jako martwe, a wypełnione strzałki pokazują przykłady komórek liczonych jako żywe. TPA pośredniczy w rozprzestrzenianiu się napadów w mózgu. Oprócz blokowania śmierci komórek nerwowych, leczenie neuroserpty również wydawało się łagodzić progresję i generalizować aktywność konwulsyjną. W celu dalszego zbadania tego nieoczekiwanego odkrycia, sekwencję konwulsyjnego zachowania analizowano na szczurach po wstrzyknięciu KA do ciała migdałowatego i podaniu PBS lub neuroserpiny do hipokampa. Odpowiedź na KA u zwierząt traktowanych PBS została scharakteryzowana najpierw przez jednostronne toniczno-kloniczne skurcze twarzy, po której nastąpiła przednia kończyna, a następnie przez uogólnienie obejmujące wszystkie cztery kończyny (Figura 4). Wstrzyknięcie neuroserpiny do hipokampa nie wiązało się z istotnym opóźnieniem początku aktywności ruchowej twarzy, co wskazuje, że neuroserpin nie hamuje bezpośrednio działania KA. Leczenie neuroserpinem znacznie osłabiło rozprzestrzenianie się aktywności ruchowej do przedniej kończyny o około 30 minut (P <0,05) i całkowicie zablokowało uogólnienie na obustronne skurcze (P <0,004). Leczenie nieaktywną neuroserpiną, rozszczepioną w jej reaktywnej pętli środkowej (13), nie łagodzi progresji napadów, co wskazuje, że aktywność hamująca nerwoból jest konieczna dla tego efektu (nie pokazano). Ponieważ neuroserpina jest naturalnym inhibitorem tPA w mózgu, obserwacje te sugerują, że tPA nie pośredniczy w indukcji aktywności napadowej wytworzonej przez wstrzyknięcie KA do ciała migdałowatego, ale raczej sprzyja rozprzestrzenianiu się i utrzymywaniu nieprawidłowej aktywności elektrycznej. Figura 4Kliniczna analiza napadów drgawkowych u szczurów. U szczurów traktowanych KA wstrzykiwano neuroserpinę (Ns) lub PBS, jak opisano w Methods, a zachowanie drgawkowe rejestrowano przez 2 godziny. Zachowanie konwulsyjne zostało sklasyfikowane w trzech kategoriach: 1, drgawki atakujące jedną stronę twarzy lub szyi; 2, drgawki obejmujące kończyny tylko po jednej stronie; i 3, uogólniona obustronna aktywność napadowa obejmująca cztery kończyny. Dla każdego warunku, n = 6 * P <0,05 w stosunku do zwierząt traktowanych PBS. Żadne zwierzęta nie zostały uogólnione podczas eksperymentu. Neuroserpin blokuje elektrograficzne rozprzestrzenianie się aktywności emocjonalnej. Hipokamp związany jest z genezą i rozmnażaniem się czynów pochodzących z odległych struktur mózgu, takich jak ciało migdałowate. Zbadaliśmy zatem, czy leczenie neuroserpiną blokuje również rozprzestrzenianie się nieprawidłowej aktywności elektrycznej związanej z iniekcją KA do ciała migdałowatego. Dwustronne monitorowanie miejscowych potencjałów pola hipokampowego wykazało, że leczenie neuroserpiną zmniejszyło natężenie aktywności międzyprzedsionkowej po wstrzyknięciu KA i zablokowało rozwój napadów hipokampa. W przeciwieństwie do tego, zwierzęta leczone PBS wykazywały aktywność międzyprzedmiotową po wstrzyknięciu KA, które szybko uległy progresji do powtarzających się epizodów obustronnych napadów hipokampa (Figura 5, aib, duże czarne strzałki). Dane te sugerują, że rozprzestrzenianie się i synchronizacja aktywności fizycznej jest zjawiskiem zależnym od tPA, które jest blokowane przez administrowanie neuroserpiną. Figura 5 Nagrywanie EEG u szczurów z napadami indukowanymi KA. Elektrody monopolarne zostały umieszczone w hipokampie po stronie ipsilateralnej lub kontralateralnej, jak opisano w Metodach. a i c są ipsilateralne (I psi), a b i d są kontralateralne (Contra) do wtrysku KA [hasła pokrewne: rezonans magnetyczny kościerzyna, sanatorium krynica górska, ostrzykiwanie osoczem cena ] [podobne: rezonans magnetyczny kościerzyna, olej z awokado właściwości, ostrzykiwanie osoczem cena ]