Wariant SCID ze specyficznymi odpowiedziami immunologicznymi i przewagą Komórki T czesc 4

Sekwencje V. 4 wykryto w 7/8 produktów PCR i 5/5 sekwencji klonów, potwierdzając dane cytometrii przepływowej i spektroskopii. Chociaż stwierdzono dominującą sekwencję, można wyraźnie wykazać tło poliklonalne, ujawniając bardziej zróżnicowane spektrum na poziomie molekularnym (Figura 8). Analiza . sekwencje ujawniły pewne złożone regiony łącznikowe z lub 2 elementami D, podczas gdy w 2 sekwencjach brakowało elementów D. Wszystkie 3 klony wykorzystywały element V. 3, który był również w przeważającej mierze wyrażany przez obwodowe. Komórki T. Rysunek 8V (D) Sekwencje połączeń J Komórki T. Zidentyfikowane segmenty V (D) J są wytłuszczone; Nsekwencje są podkreślone. Liczba powtórzeń sekwencji wśród produktów PCR i sekwencji klonów podano w nawiasach. V. 2 . Komórki T wykazują reaktywność wobec fibroblastów zakażonych CMV. Ponieważ pacjent przeszedł kilka infekcji wirusowych przed analizą immunologiczną, okazało się, że konfiguracja. Na te infekcje wpływ mogły mieć repertuar komórek. Uwzględniając obserwację, że V. 2neg. Klony komórek T od biorców przeszczepionych nerki zakażonych CMV wykazują reaktywność przeciwko CMV (7), testowaliśmy czy. Komórki T od naszego pacjenta były w stanie rozpoznać komórki docelowe zakażone CMV. Zatem inkubowaliśmy różne V. 2. Klony komórek T od pacjenta i zdrowa kontrola z zakażonymi CMV i niezainfekowanymi ludzkimi fibroblastami napletka (HFF). Ponadto, zbadaliśmy klony 2 V. 9AVp2 komórek T ze zdrowych kontroli. Po 24 godzinach koinkubacji z komórkami docelowymi, wytwarzanie TNF oznaczano ilościowo w teście biologicznym z użyciem komórek WEHI (43). Cztery z 5 klonów od pacjenta wytworzyły znaczne ilości TNF w odpowiedzi na stymulację CMV (Figura 9). Specyficzne dla CMV wytwarzanie TNF zostało również wykryte przez V. 2. Klony komórek T od zdrowego dawcy, ale. zgodnie z oczekiwaniami . nie przez klony 2 V. 9AV. 2. Figura 9 Reaktywność reaktywności V. 2. Klony komórek T. Dwa V. 9aVp2 i 3V2 2aVs9. klony ze zdrowych kontroli, a także 6. Klony komórek T wykorzystujące różne kombinacje receptorów komórek T od pacjenta badano pod względem reaktywności CMV. Wykorzystanie TCR klonów analizowano różnymi przeciwciałami. Klony inkubowano z zakażonymi CMV i niezainfekowanymi fibroblastami, a uwalnianie TNF oznaczano ilościowo w teście biologicznym na komórkach WEHI (43). * Przeciwciało użyte do scharakteryzowania tych klonów reaguje ze wszystkimi 3. białka łańcuchowe. Dyskusja Dokumentujemy nowy wariant SCID związany z hipomorficzną mutacją RAG1, która obejmuje normalne poziomy immunoglobulin, zdolność do wytwarzania swoistych przeciwciał przeciwko zakaźnym i autoantygenom oraz przewagę. Komórki T. Nasz pacjent spełniał kryteria kliniczne SCID, w tym: brak rozwoju, uporczywe zakażenie candida, nawracające zapalenie płuc i ciężkie zakażenia wirusem ospy wietrznej-półpaśca (VZV), CMV i EBV. Wystąpiła również głęboka limfopenia z prawie całkowitym brakiem limfocytów B i znacznie zmniejszoną liczbą limfocytów T i małą grasicą. Jednak normalne do podwyższonych poziomów wszystkich klas immunoglobulin i swoiste przeciwciała IgM i IgG przeciwko niektórym antygenom szczepionkowym i czynnikom zakaźnym wskazywały na znaczącą pozostałą funkcję komórek B i T, nietypową dla SCID. Odpowiedź przeciwciał na antygen błoniczy, VZV i CMV, ale nie przeciw tężcowi i EBV, sugeruje ograniczony repertuar specyficzności komórek B. Wytwarzanie specyficznych przeciwciał przeciwko szczepieniu przeciw błoniczkowemu, zakażeniu HSV-1 i autoprzeciwciałom neutrofilowym było wcześniej obserwowane u pacjentów z atypowym RAG1 SCID, którzy mieli wszczepienie macierzyńskiego T komórki, ale nie mieli komórek T gospodarza (8). Ten pacjent nosił mutację R559S tylko 2 aminokwasy N-końcowe od mutacji R561H wystawianej przez naszego pacjenta. Dane wskazują, że częściowa funkcja RAG1 z powodu mutacji w domenie interakcji RAG1 / RAG2 wpływa na różnicowanie komórek B i różnorodność repertuarową, ale nadal pozwala na rozwój niektórych funkcjonalnych komórek B. Jest to również poparte znalezieniem rearanżacji immunoglobulin w ramce w prekursorowych komórkach B szpiku kostnego pacjenta z mutacją R481 H481P i fenotypem T. B. SCID (9). Obecność autoprzeciwciał u naszego i wcześniej zgłoszonego pacjenta może być spowodowana zaburzoną regulacją limfocytów T. Jednak możliwe jest również, że odzwierciedla to opisaną rolę enzymów RAG w regulacji autoprzeciwciał poprzez edycję receptorów (10). Pacjenci z hipomorficznymi mutacjami RAG prezentującymi OS zazwyczaj wykazują dużą liczbę krążących komórek T z bardzo ograniczonym repertuarem komórek T (11. 14). Przewaga kilku klonogennych receptorów komórek T jest już wykrywalna w grasicy, a odmienny rozkład klonotypów można znaleźć w różnych tkankach, co sugeruje, że w OS, oligoklonalność repertuaru komórek T wynika zarówno z wrodzonego ograniczenia, jak i rozszerzenia peryferyjnego ( 12, 15)
[podobne: gatunek tłustego śledzia, rezonans magnetyczny kościerzyna, łyżeczka cukru ile to gram ]
[więcej w: eve centrala, rezonans magnetyczny kościerzyna, eve central ]