Zależna od komórek T produkcja IFN-y przez komórki NK w odpowiedzi na wirus grypy A. czesc 4

W przypadku 25 testowanych dawców odsetek komórek IFN – (3 + w podgrupach NK CD56bright i CD56dim był dodatnio skorelowany z odsetkiem komórek T IFN – y + lub komórek T specyficznych dla grypy (P. 0,002; Figura 6). Podsumowując, wyniki te sugerują, że IFN-y odpowiedź komórek NK na fluA jest związana z podzbiorem komórki T specyficznej dla grypy. Rysunek 6 Poziom IFN-y Odpowiedź na podgrupy komórek NK koreluje z częstością komórek T specyficznych wobec grypy w PBMC 25 dawców. PBMC inkubowano z fluA przez 17 godzin, a następnie cytometryczną analizą cytometrii przepływowej w celu określenia odsetka komórek IFN- (3 + w podzbiorze CD56bright perforin + NK (oznaczonym jako CD56bright), perforacji CD56dim. Podzbiór NK (oznaczony jako CD56dim) i podzbiór komórek T CD3 + każdego dawcy. Procent komórek IFN – (3 + w każdym podzbiorze NK wykreślono odpowiednio w stosunku do populacji komórek T od tego samego dawcy. Oszacowany współczynnik korelacji Spearmana rS i P jest podawany na każdym wykresie. IL-2 wytwarzana przez limfocyty T specyficzne dla grypy jest zaangażowana w odpowiedź IFN-y komórek NK na fluA. Doniesiono, że IFN-y indukowane przez rekombinowane IL-2 wytwarzanie przez mysie i ludzkie komórki NK (9, 29) i zwiększone IFN-y indukowane przez IL-12p wytwarzanie przez ludzkie komórki NK CD56bright (16). Aby przetestować hipotezę, że IL-2 jest zaangażowana w IFN-y zależny od komórek T wytwarzając komórki NK w odpowiedzi na fluA, najpierw zbadaliśmy, czy IL-2 wytwarzano w PBMC hodowanych z fluA. Jak pokazano na Figurze 7, IL-2 była rzeczywiście produkowana przez limfocyty T po ekspozycji na fluA, która poprzedziła początek IFN-y. wytwarzanie przez komórki NK (Figura 7C). Większość komórek IL-2 + wytwarzała również IFN-y, podczas gdy większość komórek IFN – (3 + nie wytwarzała IL-2 (Figura 7, A i B), co wskazuje, że tylko podzbiór limfocytów T specyficznych dla grypy był zdolne do wytwarzania IL-2. Rysunek 7IFN-. oraz wytwarzanie IL-2 przez komórki NK i limfocyty T w odpowiedzi na fluA. PBMC od dorosłych dawców inkubowano z fluA lub SPG (kontrola negatywna) przez 12 godzin, z dodaniem brefeldyny A przez ostatnie 5 godzin (A i B) lub inkubowano z fluA przez 4-12 godzin, z dodaniem brefeldyny A przez ostatnie 5 godzin. 4 godziny (C). Komórki wybarwiono na CD56, utrwalono i permeabilizowano, a następnie wybarwiono wewnątrzkomórkowo pod kątem CD3, IFN-a i IL-2. (A) Wykresy punktowe dla reprezentatywnego dawcy (nr 7) prezentujące komórki bramkowane na populację komórek NK CD3 + CD56 + (lewe panele) lub populację komórek T CD3 + (prawe panele). Liczby na wykresach punktowych odnoszą się do procentu komórek wytwarzających cytokiny w każdym kwadrancie. (B) Podsumowanie poziomów IFN-y oraz wytwarzanie IL-2 przez komórki T od 4 dawców (nr 7. 10). IL-2 nie wykryto w komórkach NK od któregokolwiek z tych 4 dawców. (C) Kinetyka wytwarzania IL-2 przez komórki T i IFN-y produkcja przez komórki NK (dawcy nr 20). Następnie zbadaliśmy wpływ neutralizującego Ab IL-2 (3 na IFN-y. produkcja przez komórki NK. W 5 z 6 badanych dawców, IFN-y indukowany przez fluA wytwarzanie przez komórki NK zostało zahamowane przez ABS neutralizujący IL-2 (3 do 67% (Figura 8). Ten wynik sugeruje, że IL-2 wytwarzana przez limfocyty T specyficzne dla grypy jest zaangażowana w IFN-y. produkcja komórek NK u większości, ale nie u wszystkich dawców. Figura 8 Impresja IFN-y wytwarzanie komórek NK w odpowiedzi na fluA przez Ab neutralizujące IL-2a. PBMC od 6 dawców (nr 11-16) inkubowano z fluA przez 17 godzin w obecności odpowiednio anty-IL-2Ba lub jego kontroli izotypowej (4 .g / ml), a następnie barwienia wewnątrzkomórkowego dla IFN-a. do określania częstotliwości komórek NK IFN-a + CD3a CD56 +. Na wykresie słupkowym wyświetlane jest procentowe tłumienie dla każdego dawcy, które jest zdefiniowane jako [1. (częstość komórek IFN – a + NK w obecności antyAIl-2) / (częstość komórek NK IFN – a + w obecności kontroli izotypowej)] × 100. Na koniec ocenialiśmy, czy rekombinowana IL-2 może zastąpić limfocyty T w indukcji IFN-y wytwarzanie przez komórki NK w odpowiedzi na fluA. Jak pokazano na rysunku 9, podczas gdy IFN-y produkcja komórek NK została zredukowana do poziomu tła poprzez zmniejszenie liczby limfocytów T CD3 +, dodanie rekombinowanej IL-2 do PBMC zubożonych w CD3 hodowanych z IFN-y przywróconym dla fluA. produkcja komórek NK. Podsumowując, wyniki te wskazują, że IL-2 wytwarzana przez komórki T specyficzne względem grypy jest jednym z czynników regulujących IFN-y. odpowiedź komórek NK na fluA. Figura 9 Funkcja pomocnicza limfocytów T dla IFN-y indukowanego przez fluA. produkcję w komórkach NK można zastąpić egzogenną IL-2. PBMC lub PBMC zubożone w CD3 od 3 dawców (nr 17. 19) inkubowano z fluA lub kontrolą przez 17 godzin, z lub bez dodatku rekombinowanej IL-2 (250 U / ml). Wyświetlane na wykresach są częstotliwości komórek IFN – (3 + w podzbiorach komórek NK CD56bright lub CD56dim w każdych warunkach. Omówienie Odpowiedź immunologiczna gospodarza na zakażenie obejmuje zorganizowane działania różnych składników układu odpornościowego
[podobne: przelicznik gram na szklanki, eve online polska, dom zdrojowy szczawno zdrój ]
[podobne: łyżeczka cukru ile to gram, sanatorium krynica górska, szpital psychiatryczny lublin ]